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有關(guān)肝硬化免疫學(xué)檢查


日期: 2007 - 02 - 09   作者:   來(lái)源:   責(zé)編:   閱讀次數(shù): 294
本文摘要:

    免疫指標(biāo)不是肝功能的直接指標(biāo),但由于肝臟承擔(dān)了體內(nèi)蛋白質(zhì)及其他物質(zhì)的合成與代謝,因此能直接或間接地影響與調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫狀態(tài),通過(guò)對(duì)血清ig及補(bǔ)體的檢測(cè),可在一定程度上反映受檢者肝臟的疾病和損傷。免疫免疫功能的檢測(cè)主要包括體液免疫(免疫球蛋白、補(bǔ)體)和細(xì)胞免疫的測(cè)定。
    1.免疫球蛋白和補(bǔ)體測(cè)定 肝臟不是兔疫球蛋白的合成場(chǎng)所,但對(duì)血清中免疫球蛋白含量起重要的調(diào)節(jié)作用。這種調(diào)節(jié)作用表現(xiàn)在:影響腸道內(nèi)抗原物質(zhì)的吸收及處理、通過(guò)庫(kù)普弗細(xì)胞對(duì)抗原呈現(xiàn)特殊遞呈作用/卜體靜脈側(cè)支循環(huán)HJ將腸道來(lái)源的抗原直接暴露在全身免疫系統(tǒng)而誘導(dǎo)機(jī)體大量抗體的產(chǎn)牛等,肝病是導(dǎo)致外周血免疫球蛋白非特異仕升高的六大病種之一。急仕肝炎多為lgM1高(卜一1(大廣 慢性肝炎kG、kA皆升高,以k(Z為主。肝硬化則k(i、18A、18M皆升高.f巴以lgA it高為顯著。肝癌則lgM降低,lgA升高最明顯;當(dāng)然以k這些變化是相對(duì)而言.并下是絕對(duì)的_
    補(bǔ)體與肝臟的關(guān)系更為密切,部分補(bǔ)體及其抑制H子山肝臟合成.肝臟的感染和炎癥后應(yīng)。】刺激機(jī)體免疫系統(tǒng).導(dǎo)致血清總杯體is件及其他補(bǔ)作成5肝內(nèi)含量增加.這種現(xiàn)象可見于項(xiàng)后較好的急性病毒性肝炎早期。當(dāng)肝實(shí)質(zhì)受到嚴(yán)重?fù)p傷時(shí),補(bǔ)體成分的合成相應(yīng)減少,這種減少往往在肝病的晚期,同時(shí)伴有顯著的肝功能受損 此外任何造成肝實(shí)質(zhì)損傷與肝臟血流動(dòng)力學(xué)變化均叮導(dǎo)致循環(huán)免疫復(fù)合物在外周血中的積聚.其結(jié)果導(dǎo)致對(duì)補(bǔ)體的過(guò)量激活,使血清中補(bǔ)體含量消耗性降低,急性降低多見于急性重癥肝炎,慢性消耗性減低主要發(fā)生在多種補(bǔ)體成分自身免疫。什疾病、自身免疫性肝炎肝硬化及其他原因?qū)е碌母尾⊥砥凇?br />    2.細(xì)胞免疫功能測(cè)定 包括體內(nèi)法和體外法.兩種方法在基礎(chǔ)免疫中已有詳述,這衛(wèi)只將最新的檢查力法—一流人細(xì)胞儀檢查法作些介紹。
    流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry,F(xiàn)CM)是 20世紀(jì) 80年代發(fā)展起來(lái)的一壩利用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析的新技術(shù)。流式細(xì)胞術(shù)集激光術(shù)、微電腦、單克隆抗體技術(shù)、細(xì)胞色素化學(xué)于一體,形成了快速、準(zhǔn)確的分析和細(xì)胞分選技術(shù)方法。FCM在臨床和基礎(chǔ)研究中的價(jià)值主要體現(xiàn)于免疫表型分析、DNA含量分析和細(xì)胞分選三個(gè)方面。其中免疫表型分析在細(xì)胞免疫功能測(cè)定中起著重要作用。原理是用細(xì)胞表面特異性單克隆抗體與細(xì)胞作用,再利用熒光結(jié)合的第二抗體與之作用。通過(guò)抗原抗體反應(yīng),使陽(yáng)性細(xì)胞標(biāo)上熒光,此為間接標(biāo)記法;或?qū)⑻禺愋詥慰瓜葮?biāo)記上熒光再直接與細(xì)胞結(jié)合發(fā)光,此為直接標(biāo)記法。當(dāng)細(xì)胞流經(jīng)流式細(xì)胞儀,激光束(488urn)對(duì)高速通過(guò)的細(xì)胞流照射,使熒光染料產(chǎn)生不同波長(zhǎng)的散射光,光信號(hào)收集后經(jīng)由PMT(光電倍增管)放大并加以分析處理,在短時(shí)內(nèi)可獲取細(xì)胞大小、核質(zhì)比、熒光強(qiáng)度和陽(yáng)性百分比等數(shù)據(jù),較之熒光顯微鏡分析具有客觀、快速、信息量大,統(tǒng)計(jì)處理準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用FCM對(duì)細(xì)胞免疫功能的檢測(cè)主要用于:
    (1)對(duì)細(xì)胞分群和細(xì)胞亞群的分析 利用CD45/CD14可以分出外周血中的白細(xì)胞和單核細(xì)胞,在白細(xì)胞內(nèi)利用 CD3、CD19、CD20、CD3一/(CD16+56)十等標(biāo)記進(jìn)一步可分出T、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞等。在T細(xì)胞內(nèi)又有CD4/CDS標(biāo)志的T輔助/誘導(dǎo)和T抑制/殺傷亞群,利用 CD4/CD29、CDS/CD28標(biāo)志可以將T4、TS進(jìn)一步分出谷亞群。
    (2)檢測(cè)淋巴細(xì)胞的活化CD3/HLA-DR、CD3/CD25、CD69等都是活化T淋巴細(xì)胞的特異性標(biāo)記,另有C17單抗是活化的細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞的標(biāo)志物。其比值的改變對(duì)病情監(jiān)測(cè),療效判斷有重要的指導(dǎo)意義。
    (3)一些特殊的標(biāo)志如CD4/CD8比值是AIDS、自身免疫性疾病病程監(jiān)測(cè)的重要指標(biāo)。q
    常用免疫表型分析單抗及正常值見表分3。
                            表5-3 常用外周血表型分析值       (+/-)表示加減
       CD分類             意義           正常值(百分?jǐn)?shù))X(+/-)2S
-——————一——————————-————一 一———一—一————————————一—————一———————————-—————
       CD3              總T淋巴細(xì)胞                             65.86(+/-)9.60
       CD2              花環(huán)形成細(xì)胞                             77.46(+/-)9.27
       CD4              T輔助/T誘導(dǎo)亞群                      37.53(+/-)8.91         
    CD4+/CD29-        輔助性T細(xì)胞                      21.22(+/-)8.98
    CD4+/CD29+       輔助細(xì)胞誘導(dǎo)亞群             16.86(+/-)5.30
       CD29                 輔助和抑制細(xì)胞誘導(dǎo)亞群  59.45(+/-)12.49
       CD8                   T抑制/T殺傷亞群                 28.01(+/-)10.13
    CD8+/CD28-         T抑制細(xì)胞亞群                   16.96(+/-)9.35
    CD8+/CD28+         T殺傷細(xì)胞亞群                  11.73(+/-)3.44
  CD3-/CD(16+56)+    自然殺傷細(xì)胞              16.27(+/-)8.50
       CD19                         總B細(xì)胞                        11 .74(+/-)3.37
       CD25                         IL-2Ra鏈                        14.34(+/-)0.14
  CD4/CD8比值                1.53(+/-)0.71               153十0 71
    外周血取自上海市46名職員獻(xiàn)血者。


    總之,肝硬化時(shí)山有以廠化度學(xué)改變:細(xì)胞免疫檢查則發(fā)現(xiàn)半數(shù)以上患者T淋巴細(xì)胞數(shù)低于正常。T細(xì)胞及其亞群的單克隆抗體檢測(cè),結(jié)果常示CD3降低、CD4略低、CD8無(wú)多大改變,CD4/IgM均可升高。一般以 IgG增高為最顯著,與r-球蛋白升高相平行。lgG增高的機(jī)制系由于腸原性多種抗原物質(zhì)經(jīng)吸收至肝臟后,不能被肝臟庫(kù)普弗細(xì)胞吞噬和降解,或通過(guò)門脈側(cè)支循環(huán)直接進(jìn)入體循環(huán),引起的免疫反向。此外,部分患者環(huán)可出現(xiàn)非特異性自身抗體,如抗核抗體、平滑肌抗體等。


 



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